疫情當下,很多企業(yè)也依舊在家辦公,當然我們公司也是哦!在家也可以為大家介紹介紹我們實驗室常見的幾種細胞!
一、Hela細胞
Hela細胞是在所有細胞株中著名的。它來源于美國的Helen Lane,她1951年死于子宮頸癌。但源自她的腫瘤的細胞卻在世界各地的實驗室中得到廣泛的使用。
來源:人宮頸癌
形態(tài):上皮細胞
生長特性:貼壁
注釋:Hela細胞顯角蛋白免疫沉淀染色陽性,包含HPV-18序列,有正常水平的pRB和p53的低水平表達。
培養(yǎng)液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10%胎牛血清
傳代:吸去培養(yǎng)液。用0.25%(w/v)Trypsin-0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶活性)。加2-3毫升Trypein-EDTA,放37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:2到1:6為宜,每周傳代2-3次)
凍存:95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。
二、BHK21細胞
此細胞常在Baculovirus表達系統(tǒng)中用作宿主細胞,來生產(chǎn)獸用疫苗。
來源:敘利亞倉鼠腎細胞
形態(tài):纖維原細胞
生長特性:貼壁
注釋:這個細胞來自于一只出生一天的新生倉鼠,隨后被改造成一個易于作表達的宿主細胞株。
培養(yǎng)液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉)+ 10%胎牛血清。
傳代:吸去培養(yǎng)液。用0.25%(w/v)Trypsin-0.03 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶活性)。加2-3毫升Trypein-EDTA,放37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:2到1:10為宜,每周傳代1-2次)
凍存:95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。
三、HepG2細胞
Hep G2細胞來源于一個15歲白人的肝癌組織。該細胞分泌多種血漿蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。該細胞能大容量培養(yǎng),乙肝表面抗原陰性,對G418有抗性,對人生長激素有刺激反應。
來源:人肝癌細胞
形態(tài):上皮細胞
生長特性:貼壁
注釋:該細胞表達3-羥基-3-甲基戊二酸輔酶A還原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。該細胞在有百草枯(英文名:gramoxone)的環(huán)境下過氧化氫酶mRNA表達增加,ApoA-I mRNA 表達減少。
培養(yǎng)液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉)+ 10%胎牛血清。
傳代:吸去培養(yǎng)液。用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:4至1:6為宜,傳代期間培養(yǎng)液每周更換2次)
凍存: 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。
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