血清正確的保存對實驗有著至關(guān)重要的作用!近有很多老師詢問了技術(shù)人員一些血清問題,今天小編對所有問題做了個匯總,一起來看看吧!
問題一:如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
答:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
問題二:血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
答:沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的 轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用 產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。
問題三:如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
答:按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
問題四:培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
在此,恒遠技術(shù)員解析血清的質(zhì)量標(biāo)準:
(1)牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。
(2)證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。
(3)有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。
(4)無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。
(5)對細胞有良好的支持繁殖作用。
(6)血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。
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