人胰島素試劑盒操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內壓 實自封條,密封口袋,放回4℃?! ?br />2.空白孔加標準品和標本稀釋液,其余相應孔中加標本或不同濃度標準品(100ul/孔),用封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱孵育90分鐘。
3.提前20分鐘準備生物素化抗體工作液?! ?br />4.洗板5次?! ?br />5.空白孔加生物素化抗體稀釋液,其余孔加入生物素化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱孵育60分鐘。
6.提前20分鐘準備酶結合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置?! ?br />7.洗板5次。
8.空白孔加酶結合物稀釋液,其余孔加入酶結合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘?! ?br />9.打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序?! ?br />10.洗板5次?! ?br />11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘?! ?br />12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值(3分鐘內)。在儀器保存讀數(shù)結果并打印一份紙質結果。
13.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結束?! 〗ㄗh保存酶標板框,以備下次或者今后試驗使用?!?br />人胰島素試劑盒檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,以平衡至室溫?! ?br />2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:20)。未用完的放回4℃?! ?br />3. 標準品: 加入標準品/標本稀釋液0.5ml至凍干標準品中,靜置15分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為1000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進行稀釋。(建議標準曲線使用以下濃度: 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml)。復溶標準品原液(1000 pg/ml)若未用完請分裝后放入-20℃以下電冰箱內保存,保存兩個月。已稀釋的標準品請廢棄?! ?br />4. 生物素化抗體工作液:按當次試驗所需要得用量,使用前20分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:30)成工作濃度。當日使用。若實驗次數(shù)過多導致生物素化 抗體量不足,可向我們公司單獨購買生物素化抗體。(須提供抗體批號)
5. 酶結合物工作液:按當次試驗所需要得用量,使用前20分鐘,以酶結合物稀釋液稀釋濃 縮酶結合物(1:30) 成工作濃度。當日使用。若實驗次數(shù)過多導致濃縮酶結合物量不足, 可向我們公司單獨購買濃縮酶結合物。(須提供酶結合物批號)
洗滌方法:
1. 自動洗板機:要求注入的洗滌液為350ul,注入與吸出間隔15-30秒。洗板5次?! ?br />2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350ul,靜置30秒后甩盡液體,在厚迭吸水紙上拍干。洗板5次?!?/p>