化學發(fā)光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:
(1)化學發(fā)光標記免疫分析法;
(2)酶標記、以化學發(fā)光底物作信號試劑的化學發(fā)光酶免疫分析法
化學發(fā)光標記免疫分析
化學發(fā)光標記免疫分析又稱化學發(fā)光免疫分析(CL IA ) , 是用化學發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) , 是有效的發(fā)光標記物[ 3 ] , 其通過起動發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發(fā)光, 強烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成, 為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標記物用于免疫分析, 其化學反應簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法, 大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。
化學發(fā)光酶免疫分析
從標記免疫分析角度, 化學發(fā)光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發(fā)光劑, 操作步驟與酶免分析*相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(zhì)(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應復合物上的酶再作用于發(fā)光底物, 在信號試劑作用下發(fā)光, 用發(fā)光信號測定儀進行發(fā)光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發(fā)光底物。