應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問題,一直是一個普遍存在的突出問題。據(jù)統(tǒng)計,國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉污染,這樣不僅造成了浪費,還讓實驗結(jié)果不如人意。
對正常細胞系的鑒定
(1)鑒定細胞的種系來源:常用方法主要有染色體分析、同工酶分析、DNA指紋圖譜等技術(shù)。
(2)鑒定細胞的組織來源:可通過形態(tài)學(xué)手段、檢測組織特異性抗原等進行鑒定。
(3)細胞是否發(fā)生轉(zhuǎn)化和惡變:主要通過核型分析、細胞生長行為觀察(是否喪失接觸抑制)、裸鼠成瘤實驗等進行鑒定。
(4)細胞有無發(fā)生交叉污染,主要通過同工酶及DNA指紋圖譜技術(shù)進行鑒定。
對腫瘤細胞系的鑒定
對腫瘤細胞系的鑒定主要圍繞其惡型性展開,染色體的異常、接觸抑制和密度依賴生長特性的改變、集落形成能力、裸鼠成瘤、動物體內(nèi)的侵襲生長,以及某些基因、分子水平的特征均是腫瘤細胞鑒定的方向。