由于瑞氏染液的實(shí)用性,所以瑞士染色法在臨床上zui常使用,下面就由上海勁馬朱為大家分享一下關(guān)于他在瑞士染色法的研究心得。
瑞氏染液是由酸性染料伊紅和堿性染料美藍(lán)組成的復(fù)合染料,溶于甲醇,伊紅通常為鈉鹽,有色部分為陰離子。亞甲藍(lán)(又名美藍(lán))為四甲基硫堇染料,有對(duì)醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽,即氯化美藍(lán),有色部分為陽(yáng)離子。美藍(lán)容易氧化為一、二、*基硫堇等次級(jí)染料(即天青)。將適量伊紅、美藍(lán)溶解在甲醇中,即為瑞氏染料。
瑞氏染液染色原理:
既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對(duì)各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白、淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色或藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫紅色,稱為嗜中性物質(zhì)、原始紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞胞質(zhì)、核仁含較多酸性物質(zhì),染成較濃厚的藍(lán)色;中幼紅細(xì)胞既含酸性物質(zhì),又含堿性物質(zhì),染成紅藍(lán)色或灰紅色;*成熟紅細(xì)胞,酸性物質(zhì)*消失后,染成粉紅色。
瑞氏染液染色方法和注意事項(xiàng):
(1)血涂片干透后固定,否則細(xì)胞在染色過(guò)程中容易脫落。
(2)沖洗時(shí)應(yīng)以流水沖洗,不能先倒掉染液,以醫(yī).學(xué)教.育網(wǎng)整.防染料沉著在血涂片上。沖洗時(shí)間不能過(guò)久,以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然后立即用流水沖洗。
(3)染色過(guò)淡可以復(fù)染,復(fù)染時(shí)應(yīng)先加緩沖液,然后加染液。染色過(guò)深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。
(4)瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR級(jí)以上)和甘油組成,Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液(pH6.4~pH6.8)。
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