ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。下面上海勁馬生物就根據(jù)Elisa試劑盒的三種常見檢測方法分析?下具體原理。歡迎參考學習。
問:什么是競爭性ELISA?
答:競爭ELISA基于競爭結合技術,即樣本中的待測分子與固定量的標記的同樣分子(我們一般用堿性磷酸酶作為標記)同時與固定在孔板上的抗體的同一結合位點進行競爭,參照標準曲線,試驗數(shù)據(jù)值是定量的。
問:什么是夾心ELISA?
答:夾層ELISA采用對樣本中分析物的特異的抗體作為固定化的捕獲抗體,然后用第二個帶標記的抗體作檢測,檢測抗體對分析物也是專一的。當參照標準曲線時,試驗數(shù)據(jù)值是定量的。
問:什么是直接ELISA?
答:直接ELISA是將被測的分析物直接包膜在微孔板表面,然后用測試抗體來證實被測分析物的存在。當與重組蛋白(標準曲線)進行參照時,試驗數(shù)據(jù)值是半定量的。