ELISA實(shí)驗(yàn)中陰性、陽性和空白對照相互的作用

ELISA實(shí)驗(yàn)中，我們常常遇到導(dǎo)師跟我們講:關(guān)于試劑盒出現(xiàn)陰性、陽性和空白對照相對應(yīng)的問題，陽性對照品(positive control)和陰性對照品(negative control)是檢驗(yàn)試驗(yàn)有效性的控制品，同時(shí)也作為判斷結(jié)果的對照，因此對照品，特別是陽性對照品的基本組成應(yīng)盡量與檢測標(biāo)本的組成相一致。本章上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)探討將為大家具體推薦關(guān)于以上問題的解答。歡迎參考閱讀。

    ELISA檢測，要求嚴(yán)格按照試劑說明書要求，每次試驗(yàn)、每塊扳上都要設(shè)置以下3項(xiàng)對照和用途下面我司技術(shù)為您詳細(xì)介紹ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽性和空白對照的作用：

    1．空白對照：僅用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測zui終反應(yīng)的顯色“本底"、并用于酶標(biāo)儀消除、扣除“本底"，即：以本底為“零"讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值（A）；或者，在計(jì)算陰性對照均值（NCx）、陽性對照均值（PCx）、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時(shí)減去空白對照的本底吸光值。

    2．陰性對照（品）：所謂陰性對照（品），應(yīng)當(dāng)是本項(xiàng)檢測試驗(yàn)中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血清免疫學(xué)試驗(yàn)中有特異性抗原與抗體反應(yīng)）之間的差異。

    3．陽性對照（品）：
    （1）陽性對照（品）的概念與要求：同陰性對照（品），只是采用“精選"的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選"，就是把收集的陽性人血清經(jīng)過數(shù)種試驗(yàn)進(jìn)行“篩試"、把含有“干擾性物質(zhì)"的血清剔除、不用，以避免出現(xiàn)“假陽性"干擾試驗(yàn)結(jié)果。
    （2）陽性對照（品）設(shè)置，也可區(qū)分為兩種類型與用途：
    一是陽性對照主要用于評價(jià)該項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性。而所設(shè)的陽性對照的測量值不列入Cutoff值計(jì)算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。

    二是陽性對照的設(shè)置，不僅用于評價(jià)試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性，而且計(jì)入Cutoff的計(jì)算。此時(shí)的Cutoff值的含義是代表該標(biāo)志物在健康（正常）人群中正常值范圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限（Cutoff）時(shí)表示有診斷意義。